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中文名称:蛋白酶 KCAS号:39450-01-6中文别名:蛋白激酶K溶液;ML蛋白酶K溶液;重组蛋白酶K英文名称:proteinase K for tritirachium album英文别名:IUB: 3.4.21.14; IUB: 3.4.21.64; EC 3.4.21.14; EC 3.4.21.64; ENDOPEPTIDASE K; 3.4.21.14; PROTEINASE K, LYOPHILIZEDEINEC:254-457-8分子式:C29H27N2O12P分子量:626.50468产品描述Proteinase K(蛋白酶K)是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶,其相对分子量约为29.3 kDa,可切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。Proteinase K应用广泛,可用于制备脉冲电泳的染色体DNA,蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶等实验,而变性剂如SDS(1%)可提高其活性,常用工作浓度为50-100 µg/mL,根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH、温度等因素确定具体的工作浓度。产品性质1)本品来源于基因重组酵母菌株;2)纯度(Native PAGE电泳检测):≥95%;3)比活性值(Specific activity):≥30 U/mg蛋白;4)不含RNase和DNase;5)在尿素和SDS中活性稳定存在;6)在较广的pH范围内(pH 4.0 – 12.0)均有活性,最佳pH范围为pH 7.5 - 9.0;7)反应条件:反应缓冲液中37℃ - 70℃温育1 h。推荐反应温度选择70℃;8)活力单位定义:在37℃,pH 7.5的条件下,每分钟释放1 µM酪氨酸所需要的Proteinase K量定义为1个活性单位;9)失活方法:反应体系中加入PMSF或DFP抑制剂即可失活,65℃温育10-15 min可部分失活。运输和保存方法冰袋运输。4℃干燥保存,有效期3年。更长期保存,可置于-20℃冷冻保存。使用方法1. 20-40 mg/mL Proteinase K储存液的配制1)将干粉溶解于稀释缓冲液中,配制成40-80 mg/mL原液;【注】:稀释缓冲液配方:20 mM Tris-HCl (pH 7.4), 1 mM CaCl2。2)使用低蛋白吸附的0.22 µm滤器过滤除菌;3)加入等体积无菌甘油,配制成含50%甘油的Proteinase K储存液。【注】:Proteinase K储存液4℃保存1年。若需反复使用,需分装保存。2. 按照核酸提取说明书添加指定量Proteinase K储存液即可。注意事项1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。2)启用后如需反复使用,需置于-20℃~-80℃冰箱冷冻或者配制成溶液后过滤除菌分装保存。3)本产品仅作科研用途!